酶标仪全波长扫描：从紫外到近红外的全光谱分析

admin 钢铁资讯 2024-11-30 2

从紫外到近红外的全光谱分析

酶标仪是一种用于测量酶活性或其他生物分子浓度的分析仪器。传统的酶标仪通常在固定波长（例如 405 nm或 450 nm）下进行检测。全波长扫描酶标仪的出现拓宽了酶标仪的应用范围，使其能够从紫外到近红外进行全光谱分析。

全波长扫描酶标仪的工作原理

全波长扫描酶标仪使用宽范围光源（例如氙灯或钨卤灯）和单色器或滤光片阵列来扫描整个光谱范围（通常为 190 nm - 900 nm）。仪器将光束投射到样品上，测量样品在每个波长下的光吸收或发射。然后将这些数据绘制成光谱图，显示样品的吸收或发射强度与波长的关系。

全波长扫描酶标仪的优点

更准确的定量：全波长扫描允许在多个波长下测量样品，从而获得更准确的定量结果。它可以补偿样品中可能存在的干扰物质的影响，确保更可靠的测量。
更全面的分析：通过提供完整的光谱，全波长扫描使研究人员能够识别和表征样品中的多个组分。它可以用于分析样品的纯度、成分和分子结构。
动力学研究：全波长扫描酶标仪可以用于研究酶促反应动力学。它允许实时监测反应过程中的光谱变化，从而提供对反应机制和动力学参数的深入了解。

全波长扫描酶标仪的应用

全波长扫描酶标仪广泛用于各种生物技术和生物医学应用中，包括：

DNA/RNA 定量：测量 DNA 和 RNA 的浓度和纯度。
蛋白质定量：测量蛋白质的浓度和纯度，例如使用 Bradford 或 BCA 法。
酶活性测定：通过监测底物或产物的吸收或发射变化来测量酶活性。
光谱分析：表征样品的分子结构、纯度和成分。
筛选：识别和表征新化合物或药物候选物。

选择全波长扫描酶标仪时要考虑的因素

在选择全波长扫描酶标仪时，应考虑以下因素：

光谱范围：仪器的光谱范围应涵盖所需的测量范围。
分辨率：单色器的分辨率决定了仪器区分不同波长的能力。
灵敏度：仪器的灵敏度将影响能够检测到的最低样品浓度。
软件：软件界面应易于使用，并提供全面的数据分析和报告功能。
附件：各种附件可用于扩展仪器的功能，例如温度控制和微孔板读取器。

结论

全波长扫描酶标仪是生物技术和生物医学研究中一项强大的工具，它提供了从紫外到近红外的全光谱分析能力。通过提供更准确的定量、更全面的分析和更深入的反应动力学研究，这些仪器拓宽了酶标仪的应用范围，使其成为各种生物分子分析的宝贵工具。

多功能酶标仪Tristar5是进口多模式酶标仪和多模式微孔板阅读器

多功能酶标仪Tristar5，是一款集成进口多模式酶标仪与多模式微孔板阅读器功能的高效设备。它搭载了多样化的读取技术与检测模式，以及滤光片或单色仪，以适应ELISA应用、荧光、发光或吸光度测量。高性能的多功能酶标仪系统支持先进的检测模式，包括但不限于：吸收光度（UV/VIS）时间分辨率荧光（TRF）时间分辨率荧光共振能量转移（TR-FRET, HTRF）荧光偏光（FP）化学发光（BRET/BRET2）NanoBRET等特定分析™以及如Lantha Screen®或AlphaScreen®等分析工具。具体详情请至官网浏览。该多功能酶标仪的高性能特点包括：配备有FlexTec光学系统，提供卓越的灵活性与灵敏度内置单色仪技术，可轻松选择离散波长，并进行光谱扫描；或通过系统滤光片滑块进行激发和发射分析，以优化灵敏度。使用技术混合时，同样可以灵活调整。配置了zui多两个双单色仪，以满足对阻隔性能的需求，确保灵敏的荧光分析。单色仪软件驱动的带宽变化功能，可适应不同分析条件的需求。单色仪提供了4-12nm的激发带宽与8-22nm的发射带宽选择，步进增量为1nm。提供宽波长范围选择，涵盖了从UV紫外吸收到远红色或近红外测量的全谱范围。具备先进的底部读取技术，增强基于细胞的分析性能，支持从下方和顶部进行高性能阅读，便于分析如粘附细胞等应用，并实现zui佳灵敏度与信号背景比。四合一全光学系统，结合了多模光学系统的稳定性和用户友好性与专用光学设备的灵敏度与多功能性，适用于基于滤光片和单色器的应用。高性能多功能酶标仪的技术参数包括：探测器采用低噪声光电倍增管，支持单光子计数模式与脉冲高度检测模式吸光度光电二极管用于吸收光度测量

关于酶标仪使用中，OD值和ABS值的文献总结

朗伯-比尔（Lambert-beer)光吸收定律：##A(absorbance)是吸光度，其值为ABS,abs（吸光值）。 ##T(transmissivity)是透光度，T与A的关系为-lg##光密度（optical density），缩写为OD”，它包含A和T两种计量方法。 [公式] 是摩尔吸光(消光)系数。根据比尔定律，吸光度A与吸光物质的浓度c和吸收池光程长b的乘积成正比。当c的单位为g/L，b的单位为cm时，则 A = abc，比例系数a称为“克分子吸收系数”，单位为L/；而M（分子质量）乘a得到ε，即摩尔吸光系数。当c的单位为mol/L，b的单位为cm时，则 A = εbc，比例系数ε称为“摩尔吸收系数”，单位为L/。 [公式] 的物理意义是：当吸光物质的浓度为1 mol/L，吸收池厚为1cm，以一定波长的光通过时，所引起的吸光度值A.ε值取决于入射光的波长和吸光物质本身吸光特性，亦受溶剂和温度的影响。 ε值愈大，基于该反应的光度测定法的灵敏度就愈高。 b是光程长度，单位为cm，通常的石英比色皿的光程为1cm，所以b=1cm。酶标仪的光程长度是液面的高度，那么实际操作中是多少呢？这是困扰我用酶标仪做测吸光度实验的一个疑点。下面来仔细分析：此为丁香园网友的回答，于是我去看了MD的酶标仪的参数：【性能特点】光栅式光谱发生器，连续波长200-1000nm，无需额外购买滤光片可检测吸光度（Abs)和荧光强度(FI)。吸收度波长范围达200－1000nm, 荧光波长范围250－850nm, 步进波长1nm可读取6、12、24、48、96和384孔微孔板。提供终点检测、动力学、单孔扫描和光谱扫描四种测读模式内置专利PathCheck探头，可把微孔板光径转化为1cm比色皿光径，还可校正移液器。用各种酶标板，如平底板、圆底板、锥形底板等都能得到准确的结果利用先进的恒温虚拟盖技术，能控制样品舱内的温度具有功能强大的数据分析软件SoftMax Pro但我现在用的是Biotek的仪器，它有这个功能吗？终于，查到了上图，还有结合Synergy H1 Operators Manual中所提到的“Available read methods are endpoint, area scan, spectral scanning, and pathlength correction .”即，【可用的读取方法是端点，区域扫描，光谱扫描和路径长度校正】，得出了我使用酶标仪测吸光度值的、具有实际操作性的方法。而且所测的数值可以和分光光度计相通。与此以来一版96孔，比分光光度计的1个比色皿效率高了极多，分光光度计用的久了确实有些累人。而且类胡萝卜素易分解，长时间的等待和放置会有影响。